- tt白
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选择培养基和鉴别培养基用液体还是固体培养基都可以,可根据具体应用范围来确定。
固体培养基广泛用于微生物的分离、鉴定、保藏、计数及菌落特征的观察等。
呈液体状态的培养基,叫液体培养基或培养液,发酵液。液体培养基因营养物质分布均匀,与菌体表面接触充分,还能大量溶解微生物的代谢产物等优点,广泛用于微生物的生理、代谢研究以及大规模的工业化生产中。
半固体培养基常用于观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定等。
扩展资料
理想的凝固剂应具备以下条件:
①不被所培养的微生物分解利用;
②在微生物生长的温度范围内保持固体状态,在培养嗜热细菌时,由于高温容易引起培养基液化,通常在培养基中适当增加凝固剂来解决这一问题;
③凝固剂凝固点温度不能太低,否则将不利于微生物的生长;
④凝固剂对所培养的微生物无毒害作用;
⑤凝固剂在灭菌过程中不会被破坏;
⑥透明度好,粘着力强;
⑦配制方便且价格低廉。实验用的凝固剂有琼脂、明胶和硅胶,后者用于配制自养微生物的固体培养基。对其他多数微生物来讲,以琼脂最为合适,一般加入1.5—2.5%即可凝固成固体。此培养基可供分离、鉴定、活菌计数、菌种保藏等用。
参考资料来源:百度百科-固体培养基
- 九万里风9
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选择培养基液体的固体的均可,固体培养基有富集和分离两种作用,液体培养基主要起富集作用。
鉴别培养基一般固体的多,如伊红美蓝固体培养基,鉴别纯种微生物时可以用液体的培养基,如糖发酵培养基就是鉴别培养基。
- 瑞瑞爱吃桃
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。 固体培养基适合于菌种和孢子的培养和保存,半固体培养基主要用于微生物的鉴定;液体培养基是发酵工业大规模使用的培养基。至于选择和鉴别是液是固,不固定
- Chen
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是固体
培养基与培养液的区别在哪里?
一、对象不一样:1、TSB对某些较难生长的细菌均能生长,可用于各种细菌的增殖培养。2、TSA常用于培养一般的细菌。二、成分不一样:1、TSA培养基的成分为:T是胰蛋白胨,S是大豆,A是琼脂。2、TSB培养基的成分为:T是胰蛋白胨,S是大豆,B是肉汤。培养基供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。扩展资料:1、液体培养基:80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。2、固体培养基:一类配制成的固体状态的基质。根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。3、半固体培养基:在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。4、脱水培养基:又称预制干燥培养基,指含有除水分外的一切成分的商品培养基。参考资料来源:百度百科-培养基2023-08-09 22:11:411
赫金格尔氏培养液配制方法?
赫金格尔氏培养液(Hektoen Enteric Agar)是一种用于肠道致病性细菌的选择性和差异性分离培养的常用培养基。下面是赫金格尔氏培养液的配置方法:材料:赫金格尔氏培养基粉纯水滤纸步骤:称取适量的赫金格尔氏培养基粉,根据你所需制备的培养液量来决定。将赫金格尔氏培养基粉加入容器中。加入适量的纯水,搅拌混合,直到粉末完全溶解。用滤纸过滤培养基,以去除悬浮的颗粒物。将培养基倒入培养皿或试管中。在培养基凝固前,在适当温度下进行无菌操作,如121摄氏度高压灭菌。培养基凝固后,可以用于肠道细菌的分离和培养。请注意:以上只是一般的赫金格尔氏培养液配置方法,具体操作可能会有所不同。建议根据具体的实验室协议和厂家提供的说明书进行操作。2023-08-09 22:11:551
植物大战僵尸2培养液怎么用 培养液六大用法
1、培养液的作用是使植物升级,和平常升级植物一样,点击所选植物的升级按钮,就可以知道升级条件中有培养液,然后满足其他条件,使用培养液即可。 2、白色培养液。白色培养液的作用是使4阶白色植物升级到5阶,使用条件是想要升级的白色植物碎片80个,白色培养液10瓶,金币50W。 3、绿色培养液使用条件和白色培养液一样,不过只能对绿色植物使用,升级条件一样。 4、蓝色培养液只能对蓝色植物使用,比如原始豌豆。升级条件是蓝色植物碎片80个,蓝色培养液10瓶,金币50W。 5、橙色培养液只能对橙色植物使用,比如火焰花女王。其他条件一样,不过橙色培养液价格太贵,需要提前积累。 6、培养液只能在无尽挑战中获得对战勋章后在对战商店进行兑换,所以还是提前积攒较好。2023-08-09 22:12:021
种子液和接种后的培养液一样吗
种子液和接种后的培养液是不同的液体。种子液是一种基础培养液,其中含有必要的营养物质,以支持细胞或微生物的生长和繁殖。通常情况下,种子液中包含多种元素、无机盐、糖类、氨基酸、维生素等成分。而接种后的培养液是在种子液中加入活菌或细胞,并通过适当的环境条件(如温度、湿度、氧气含量等)来培养它们。通过适当的时间和条件,可以产生所需要的微生物或细胞生长物质等。总的来说,种子液和接种后的培养液虽然有相似之处,但它们的组成和用途略有不同。种子液主要是为了获得足够的细胞或微生物进行接种,并为种植物或微生物提供各种必需的营养物质;而接种后的培养液是利用种植物或微生物进行繁殖和生长的特性来产生所需产品所使用的培养基。2023-08-09 22:12:091
e3培养液是什么
营养液。根据X技术网显示,e3培养液是一种植物细胞培养常用营养液,含有丰富的矿物质、维生素、氨基酸等成分。斑马鱼的培育可以利用e3培养液来辅助,可以促进斑马鱼体内细胞的新陈代谢,提供所需营养,增强抵抗力,减轻环境胁迫,有助于斑马鱼的健康生长。2023-08-09 22:12:311
t25培养瓶细胞运输装满的培养液还能用嘛
不能若细胞密度低于80%,可在原瓶中留5mL培养基继续培养,若细胞密度大于80%,可进行传代。培养瓶运输的培养液不能重复使用,请及时更换新鲜培养液培养。培养液又称植物培养液,常用户外水培植物的营养供给。培养液是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐以及维生素和水等。2023-08-09 22:12:371
用溶液培养植物时应注意那些事项
用各种溶液培养法人工培养植物时,要注意如下事项:1、营养液中必须含有植物必需的各种矿质养分;2、各养分必须以植物可利用的形态出现;3、各种养分成一定比例;4、营养液的水势不能太低,以防植物脱水;5、经常调整营养液ph,使其与植物的生长相适应;6、注意给根系通风以保持适当的根系活力;7、经常更换营养液(如每星期一次)。2023-08-09 22:12:473
培养液中酵母菌种群数量用液体培养基的原因
酵母菌可以用液体培养基来培养,培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、pH、温度等因素有关,我们可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线,从而掌握酵母菌种群数量的变化情况。(2)利用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法,这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目,所以一般用于单细胞微生物数量的测定,由于血细胞计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的,所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目。2023-08-09 22:12:561
为什么培养液中要加入血浆,为什么培养液要定期更换
加入血浆原因:因为血清主要有很多细胞因子,还有一些未确定的东西,大小分子蛋白等为细胞提供生长所必需的因子。更换培养液原因如下:1、培养液中营养物质消耗。2、培养液中,细胞产生的有害物质在培养液中积累。3、细胞会长在一起,影响进一步的繁殖。培养液:用于进行组织或细胞培养的介质之统称。Parker等根据氨基酸和维生素等物质的生理含量制备出一种基本培养液,后来Eagle等对来源于人的细胞株进行更深入的研究后发现胞质内的氨基酸及维生素的含量比基本培养液中大1-5倍,而且其中谷氨酰胺等13种氨基酸和8种维生素是必需的,于是将这些物质的浓度调整到接近细胞质内含量的水平,制成了最低必需培养液(Eagle"sminimumessentialmedium,MEM),是常用的培养液。2023-08-09 22:13:031
实验室小白篇:细胞培养用的液体
一、细胞培养所需的培养液 在细胞的研究和利用过程中,最主要的是要为细胞提供最适的生长条件,保持细胞培养开始时的群体状态。这就要求培养条件始终如一,近乎呆板地坚守细节和常规,而且细胞培养,试剂昂贵,费时、费力,不是随随便便就可以进行的。 细胞只有在最适生长条件下,才会保持正常的核型及功能。如果培养条件上打折扣,就意味着会出现带有染色体重排或突变变异株细胞。某些营养成分或生长因子用量不足或细胞高密度培养时间过长,都不是最适生长条件。 二、平衡盐溶液 平衡盐溶液具有维持渗透压、调节酸碱平衡的作用,同时可以供给细胞生存所需的能量和无机离子成分。最常用于洗涤组织或细胞、配制培养用液的基础溶液是Hanks 溶液和磷酸缓冲盐溶液(简称PBS) 。 三、血清 血清中含有丰富的营养成分,包括多种生长因子及许多未知成分。动物细胞的生长都依赖血清。血清的种类很多,包括胎牛血清、小牛血清、马血清、兔血清、人血清等。 选择一批最适于细胞的血清是很重要的,而且如有可能的话,应要求购买来源公司保留足量,以供应实验使用。这样可避免反复试用以选择最适血清所产生的费用。血清的质量可以通过检测细胞的克隆形成率来衡量。取对数生长期的细胞彻底消化后,以低密度(直径6mm 的平皿中加入约103个细胞)接种5~6 个平皿, 其中一个平皿中加入含30%血清的培养液,以测定高浓度血清的细胞毒作用。7~ 10d 后,出现肉眼可见的克隆时,倒掉培养液, 2%亚甲蓝染色2~5min,观察克隆形态、计算克隆形成率。克隆形成率一般为5%~ 10%。 四、抗生素 一般细胞培养时,抗生素不是必需添加成分。但一些特殊情况下培养液内需加入适量的抗生素,如怀疑有污染、原代培养时、新手操作不够熟练。常用的抗生素有青霉素、链霉素、卡那霉素和庆大霉素。青霉素常用剂量为100U/ml ,链霉素常用剂量为100μg/ml。常配制成100 倍或200 倍, 分装为小包装, 于-20℃条件下保存。一次用一个小包装, 避免反复冻融 。 五、特殊的添加因子 特殊的添加因子可以使细胞培养的条件得到优化。原代培养细胞接种密度需适当提高,应尽可能用营养丰富的培养液,如使用胎牛血清。这些都属于一般优化条件。细胞培养条件优化的原则是:根据细胞类型, 模拟体内环境, 添加不同的细胞生长因子及有利于细胞生存、增殖的添加剂。表1 是常用的细胞培养添加成分。 表 1 常用的细胞培养添加成分 一种细胞生长因子常常是多种细胞的丝裂原,如碱性FGF, 不仅是成纤维细胞的丝裂原,还是内皮细胞、角质细胞、黑素瘤细胞的丝裂原。EGF 可促进上皮细胞、成纤维细胞、胶质细胞及平滑肌细胞等多种细胞的增殖。 培养干细胞时,常添加白血病抑制因子( leukemia inhibitory factor, LIF ) ,又称分化抑制因子( DIA ), 是一种分泌型多肽,可抑制小鼠干细胞的自然分化。一般,可用纯化的LIF 直接加到培养液中,或使用用LIF表达载体转染过的饲养层细胞。正常的STO 细胞也可分泌。STO 细胞还分泌其他一些促干细胞生长的因子。目前,多数实验室仍使用饲养层细胞。重组的LIF 来源方便,与STO 细胞一起使用时,常用浓度为1000U/ml 。与小鼠胚胎成纤维细胞一起使用时,常用浓度为500U/ml 。 体外培养正常细胞需要使用不同生长因子的选择性组合。通常在已有的经典培养液配方基础上,添加不同因子而成。现在已有多种特定细胞培养液,且有商品供应,如血管内皮细胞培养液、神经干细胞培养液、骨髓干细胞培养液、间充质干细胞培养液、小鼠心肌细胞培养液(Claycomo Medium) 等。 六、消化液 细胞生长至一定密度时,需进行传代。消化液可使细胞脱离生长表面,离散成单个细胞。常用的消化液是0.25%、0.125%的胰蛋白酶和0.02%的二乙胺四乙酸二钠(EDTA) 溶液,以无钙镁的PBS 或Hanks溶液配制。它们可单独使用,也可按一定比例混合后使用。大部分细胞的消化可使用终浓度为0.05%胰蛋白/0.02%EDTA混合液。有些上皮细胞贴壁力强,需较高浓度的胰蛋白酶(0.25%)或延长消化时间,甚至需要37°C温育。如果温育较长时间(超过20min)细胞仍不能脱壁,则应采取分步消化的措施,即将已脱壁细胞移出至离心管,加完全培养液中和胰蛋白酶的作用,对未脱壁的细胞再添加新胰蛋白酶再次消化。 七、细胞培养用的其他液体 细胞培养时,还会用到其他一些液体,如谷氨酰胺、HEPES 、丙酮酸钠、各种细胞生长因子、各种组织或细胞条件培养液,以及调整pH 使用的5.6%NaHCO3等。 谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺时,会导致细胞因生长不良而死亡。因此,各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定,故要适时添加。可配制200倍液体-20℃ 冰箱中保存,在使用前加入培养液内,终浓度为2mmoVL 。 HEPES 是一种非离子缓冲液,在pH 7.2~7.4 范围内具有较好的缓冲能力,在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠( 0.34g/L)共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。安全浓度范围10~25mmol/L。丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。一些生长缓慢的细胞加入,可明显改善细胞状态。通常配制200倍液,-20℃ 冰箱保存,在使用前加入培养液内终浓度为1mmol/L。 另外, 2-巯基乙醇(2-Mercaptoethanol, 2-Me) 对细胞生长有很重要的作用。有人认为它相当于胎牛血清, 有直接刺激细胞增殖作用。2-Me 的活性部分是硫氢基,其中一个重要作用是使血清中含硫的化合物还原成谷胱甘肽,能诱导细胞的增殖,为非特异性的激活作用。同时避免过氧化物对培养细胞的损害。另一个重要作用是促进分裂原的反应和DNA 合成,增加植物凝集素(PHA) 对淋巴细胞的转化作用,已广泛应用于杂交瘤技术。也开始用于一些难以培养的细胞。常用终浓度为5×10-5mol/L。常配制成0.1mol/L 的储存液,用时每升培养液加0.5ml 。2023-08-09 22:13:221
植物营养液的使用方法和注意事项
1、培养液:水培养殖植株时,可以使用植物营养液作为培养液。2、叶面肥:向植物的叶片上喷洒兑水稀释后的植物营养液。3、追肥:往土壤中注入植物营养液,促进植株快速开花。4、注意事项:植物营养液需要与其它肥料配合使用。 植物营养液怎么使用 1、培养液 植物营养液可以作为水培植物的培养液使用,因为营养液中含有丰富的营养物质,能为植物提供生长所需要的养分,水培养殖植株时,最好每隔10天更换一次培养液,并且需要注意的是植物营养液的浓度不能过大。 2、叶面肥 养殖观叶植物时,需要准备塑料喷雾器或者玻璃瓶,向其中灌入植物营养液,并兑水进行稀释,然后向植物的叶片上喷洒,使其叶面更为翠绿优良,并且当天配制好的营养液需要当天使用完,以免降低肥效。 3、追肥 植物营养液可以用作追肥,养殖植物时,需要在植株生长旺季,追施1-2次的肥料,可以将植物营养液倒入土壤中,促进植株旺盛生长,并且在植物孕蕾期间,需要向其施加营养液和磷钾肥,使植株的开花数量增多。 4、注意事项 植物营养液中的养分较为单一,养殖植物时,不能只给其施加植物营养液,会导致植株生长不良,需要将植物营养液与其它肥料配合使用,具有的肥料选择可以根据养殖植物的品种进行判断。2023-08-09 22:13:311
高中生物:培养液小滴是什么?怎么形成?
微口滴管小滴培养液-培养基检查图像显微镜 微口滴管滴分法 该方法是控制接种的每小滴培养液中尽量只含有一个硝化细菌细 胞。首先用无菌的微口滴管吸取少量富集培养液的上清液,然后倾 斜锥形瓶,使瓶底露出培养液液面,以微VI滴管尖端轻轻接触锥形 瓶底,如此接种硝化细菌于增殖培养液。同样接种10。20瓶,28% 恒温箱培养3—4周,培养过程中同上检验NOr及N%-,检查硝化细 菌生长。 三种分离纯化的方法中稀释法简便易行,分离效果较好。硅胶 平板分离法可直接获得纯种。2023-08-09 22:13:462
t25培养瓶加多少培养液
t25培养瓶一般加5-6ml培养基即可,如果细胞生长较快,就每天换液,如果细胞生长较慢,2-3天换液即可。培养瓶是细胞和组织的体外培养已成为生命研究和实践的必不可少内容。培养的细胞类型繁多,从病毒到细菌和真菌,从人体细胞到动物细胞和植物细胞。按细胞对产品的贴壁要求分为三类:普通型适合细胞和组织的悬浮培养。标准型具有良好的细胞贴壁性能,适用于细胞的贴壁生长。专用型表面含有含氮官能团,能促进某些特殊细胞(如肿瘤细胞)的贴壁、生长和分化。2023-08-09 22:13:551
培养液是什么?
培养液是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等2023-08-09 22:14:122
培养基与培养液的差别
培养液,就是液态的培养基。不过,一般我们把固态的叫培养基。液态的叫培养液。完全培养液,就是含有微生物或细胞生长所必需的各种营养物质的培养液。2023-08-09 22:14:222
培养基与培养液的差别 什么叫完全培养液
培养液,就是液态的培养基. 不过,一般我们把固态的叫培养基.液态的叫培养液. 完全培养液,就是含有微生物或细胞生长所必需的各种营养物质的培养液.2023-08-09 22:14:311
什么是培养液?配制培养液应注意哪几点?
培养液是含有食用菌生长所需营养的溶液。配制时需注意3点:(1)营养物质要全面、丰富,除碳源、氮源、矿质元素和生长因素外,最好还含有一定比例的天然有机物质,如植物的根、茎、叶、皮壳、籽粒等的浸提液。(2)浓度不宜过高,以免因渗透压力太大而妨碍食用菌的吸收利用,一般碳源浓度为百分之几,氮源为千分之几,矿质元素为万分之几。(3)调节好酸碱度,多数食用菌喜欢微酸性环境,但在生长过程中,酸碱度会随着代谢产物的积累而变化,为此可加入适量的磷酸氢二钾(K2HPO4)和磷酸二氢钾(KH2PO4)等缓冲物质。2023-08-09 22:14:411
植物的培养液怎么配制?
一、常用的几种营养液配方1、硝酸钠10克、过磷酸钙70克、硫酸铵25克、硫酸钾35克、硫酸镁40克.用法:利用以上配方配制营养液时,先将其与水混合,然后再按每100升水加3克的比例加入混合好的微量元素才可使用(微量元素通常以硫酸亚铁100克、硼酸粉14克、硫酸锰10克混匀研成粉末备用).2、硝酸钾0.7克/升、硼酸0.0006克/升、硝酸钙0.7克/升、硫酸锰0.0006克/升、过磷酸钙0.8克/升、硫酸锌0.0006克/升、硫酸镁0.28克/升、硫酸铜0.0006克/升、硫酸铁0.12克/升、钼酸铵0.0006克/升.用法:使用时,将各种元素混合在一起,加水1公升,即成为营养液.在配制上述营养液时,可以根据不同花卉的不同要求,对元素的种类和用量予以增减.3、尿素5克、磷酸二氢钾3克、硫酸钙1克、硫酸镁0.5克、硫酸锌0.001克、硫酸铁0.003克、硫酸铜0.001克、硫酸锰0.003克、硼酸粉0.002克;加水10升,溶解后即制成营养液.用法:盆花生长期每周浇一次,每次用量可根据植株大小酌定.例如花盆内径20厘米的喜阳性花卉,每次约浇100毫升,而阴性花卉用量酌减.冬季或休眠期,每半月或1个月浇一次.平时水分补充仍用自来水.二、配制营养液时要注意的问题1、配制营养液时,忌用金属容器,更不能用它来存放营养液,最好使用玻璃、搪瓷、陶瓷器皿.2、在配制时最好先用50℃的少量温水将各种无机盐类分别溶化,然后按照配方中所开列的物品顺序倒入装有相当于所定容量75%的水中,边倒边搅拌,最后将水加到足量.3、在配制营养液时如果使用自来水,则要对自来水进行处理,因为自来水中大多含有氯化物和硫化物,它们对植物均有害,还有一些重碳酸盐也会妨碍根系对铁的吸收.因此,在使用自来水配制营养液时,应加入少量的乙二胺四乙酸钠或腐殖酸盐化合物来处理水中氯化物和硫化物.如果无土栽培的基质采用泥炭,就可以消除上述的缺点.如果地下水的水质不良,可以采用无污染的河水或湖水配制.三、怎样调整营养液的酸碱度营养液的酸碱度直接影响营养液中养分存在的状态、转化和有效性.如磷酸盐在碱性时易发生沉淀,影响利用;锰、铁等在碱性溶液中由于溶解度降低也会发生缺乏症.所以营养液中酸碱度(即pH值)的调整是不可忽略的.pH值的测定可采用混合指示剂比色法,根据指示剂在不同pH值的营养液中显示不同颜色的特性,以确定营养液的pH值.营养液一般用井水或自来水配制.如果水源的pH值为中性或微碱性,则配制成的营养液pH值与水源相近,如果不符要进行调整.在调整pH值时,应先把强酸、强碱加水稀释(营养液偏碱时多用磷酸或硫酸来中和,偏酸时用氢氧化钠来中和),然后逐滴加入到营养液中,同时不断用pH试纸测定,至中性为止.不同地方进行无土栽培生产时,由于配制营养液的水的来源不同,可能会或多或少地影响到配制的营养液,有时会影响到营养液中某些养分的有效性,有时甚至严重影响到作物的生长.因此,在进行无土栽培生产之前,要先对当地的水质进行分析检验,以确定所选用的水源是否适宜.2023-08-09 22:14:512
培养基和培养液有何区别?
培养液是培养基的一种 我们把液体培养基叫培养液 培养基分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基2023-08-09 22:14:581
30ML的LB培养液应该加多少 抗生素和细菌 抗生素记得是1:1 细菌是 多少
每一种抗生素的工作浓度是不一样的,需要你去查阅相关资料. 抗生素首先会配制成贮存液,比如1000×的贮存液,即是抗生素工作浓度的1000倍,那么你30ml的LB培养基中就加30ul. LB培养基灭菌后,至温度降到40摄氏度左右,才能加抗生素. 细菌接种比例你可以100:1,或者1000:1,做一个梯度,因为不同的细菌生长速度是不同的. (其实你可以请教你的师兄师姐,他们会很乐意帮助你的.)2023-08-09 22:15:171
植物克隆用母液的配制和培养基的配制
为了避免每次配制培养基都要对几十种化学药品进行称量,应该将培养基中的各种成分,按原量10倍、100倍或1000倍称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做母液。这样,每次配制培养基时,取其总量的1/10、1/100、1/1000,加以稀释,即成培养液。现将培养液中各类物质制备母液的方法说明如下。(1)大量元素。大量元素包括硝酸铵等用量较大的几种化合物。制备时,按表中排列的顺序,以其10倍的用量,分别称出并进行溶解,以后按顺序混在一起,最后加蒸馏水,使其总量达到1升,此即大量元素母液。(2)微量元素。因用量少,为称量方便和精确起见,应配成100倍或1000倍的母液。配制时,每种化合物的量加大100倍或1000倍,逐次溶解并混在一起,制成微量元素母液。(3)铁盐。铁盐要单独配制。由硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)5.57克和乙二胺四乙酸二钠(Na—EDTA)7.45克溶于1升水中配成。每配1升培养基,加铁盐5毫升。(4)有机物质。主要指氨基酸和维生素类物质。它们都是分别称量,分别配成所需的浓度(0.1~1.0毫克/毫升),用时按培养基配方中要求的量分别加入。(5)植物激素。最常用的有生长素和细胞分裂素。这类物质使用浓度很低,一般为0.01~10毫克/升。可按用量的100倍或1000倍配制母液,配制时要单个称量,分别贮藏。配制植物生长素时,应先按要求浓度称好药品,置于小烧杯或容量瓶中,用1~2毫升0.1N(克当量浓度)氢氧化钠溶解,再加蒸馏水稀释至所需浓度。配制细胞分裂素时,应先用少量0.5或1N的盐酸溶解,然后加蒸馏水至所需量。以上各种混合液(母液)或单独配制药品,均应放入冰箱中保存,以免变质、长霉。至于蔗糖、琼脂等,可按配方中要求,随称随用。培养基的配制(1)称取规定数量的琼脂和蔗糖,加入一定量的蒸馏水,加热使其溶解。(2)在烧杯中加入规定量的各种母液,包括生长调节物质和其他的特殊补加物。(3)将母液混合物加入融化的琼脂中,再加入糖类物质,定容至所需体积,搅匀。(4)用1mol/L的氢氧化钠和盐酸调节pH值。(5)趁热将培养基分装到所选用的培养容器中。(6)用棉塞或封口膜盖住瓶口。(7)在121-126℃灭菌15-20min。(8)灭菌后,待压力归零后将培养基取出让其凝固。2023-08-09 22:15:261
细菌在液体培养基中的生长现象有哪些
细菌在液体培养基中的生长现象有三种:混浊生长、沉淀生长、菌膜生长(表面生长). 1、混浊生长:大多数细菌,如大肠埃希菌、志贺菌等. 2、沉淀生长:少数链状排列的细菌,如链球菌、炭疽芽胞杆菌等. 3、菌膜生长(表面生长):专性需氧菌:如枯草芽胞杆菌、结核分枝杆菌和铜绿假单胞菌等.2023-08-09 22:15:352
选择培养基和鉴别培养基是液体还是固体?
选择培养基和鉴别培养基用液体还是固体培养基都可以,可根据具体应用范围来确定。固体培养基广泛用于微生物的分离、鉴定、保藏、计数及菌落特征的观察等。呈液体状态的培养基,叫液体培养基或培养液,发酵液。液体培养基因营养物质分布均匀,与菌体表面接触充分,还能大量溶解微生物的代谢产物等优点,广泛用于微生物的生理、代谢研究以及大规模的工业化生产中。半固体培养基常用于观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定等。扩展资料理想的凝固剂应具备以下条件:①不被所培养的微生物分解利用;②在微生物生长的温度范围内保持固体状态,在培养嗜热细菌时,由于高温容易引起培养基液化,通常在培养基中适当增加凝固剂来解决这一问题;③凝固剂凝固点温度不能太低,否则将不利于微生物的生长;④凝固剂对所培养的微生物无毒害作用;⑤凝固剂在灭菌过程中不会被破坏;⑥透明度好,粘着力强;⑦配制方便且价格低廉。实验用的凝固剂有琼脂、明胶和硅胶,后者用于配制自养微生物的固体培养基。对其他多数微生物来讲,以琼脂最为合适,一般加入1.5—2.5%即可凝固成固体。此培养基可供分离、鉴定、活菌计数、菌种保藏等用。参考资料来源:百度百科-固体培养基2023-08-09 22:15:431
大肠杆菌培养,在液体培养基中培养基混浊,怎么办
是一样的。因为大肠杆菌增殖速度很快,我们看到的混浊就是由于大肠杆菌的高速繁殖导致的。我以前做实验的时候,在lb培养基上接种很少量的大肠杆菌,12h后就整支变混浊了,你镜检过就知道那些大肠杆菌的密度有多大了。2023-08-09 22:15:532
培养基有点不透亮是不是细胞污染了
细胞培养中常见的污染情况总结如下,你可以对比一下。1、细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。 仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象! 可在培养液中加相应的抗生素处理 2、霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。 CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用过氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右),尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照。预防霉菌污染,可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗;但细胞一旦污染,很难挽救,制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞。,将环境彻底消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作3、支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应.4、黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率。 5、真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。 6、原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,最终形成恶性循环。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等2023-08-09 22:16:021
24孔transwell加多少液体
24孔板下室一般加入600μl含20S的培养基。取细胞悬液100μl加入Transwell小室。特别注意的是,下层培养液和小室间常会有气泡产生,一旦产生气泡,下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失了,在种板的时候要特别留心,一旦出现气泡,要将小室提起,去除气泡,再将小室放进培养板。培养细胞:常规培养12-48h(主要依癌细胞侵袭能力而定)。24h较常见,时间点的选择除了要考虑到细胞细胞侵袭力外,处理因素对细胞数目的影响也不可忽视。结果统计:直接计数法,“贴壁”细胞计数,这里所谓的“贴壁”是指细胞穿过膜后,可以附着在膜的下室侧而不会掉到下室里面去,通过给细胞染色,可在镜下计数细胞。取出Transwell小室,弃去孔中培养液,用无钙的PBS洗2遍,甲醇固定30分钟,将小室适当风干。0.1%结晶紫染色20 min,用棉签轻轻擦掉上层未迁移细胞,用PBS洗3遍。400倍显微镜下随即五个视野观察细胞,记数。2023-08-09 22:16:091
细菌在液体培养基中生长现象有哪3种
细菌在液体培养基生长现象有三种:1、浑浊生长:大多数细菌。2、沉淀生长:少数链状排列的细菌如链球菌、炭疽芽胞杆菌。3、菌膜生长(表面生长):专性需氧菌如枯草芽胞杆菌、结核分枝杆菌和铜绿假单胞菌。2023-08-09 22:16:255
细胞培养液如何储存,需要注意什么
细胞培养液的储存方法:细胞培养液的储存条件一般为2~8℃、密闭、避光保存,但要注意如下几点:(1)过滤后的完全培养液,即添加了血清、谷氨酰胺、抗生素等的培养液要尽快使用,一般在2~3周内使用完。(2)灭菌后的未加L-谷氨酰胺等添加剂的培养基溶液,一般可在4℃保存6~9个月,也可冷冻保存,用时解冻。(3)高压除菌后的培养基应置4℃保存,不能因为其可耐受高温而忽略储存温度。(4)添加了谷氨酰胺的培养液放置2周后,要补加和原来同样量的谷氨酰胺,但这样并不能消除谷氨酰胺降解产生的游离氨,建议配制好的培养液尽快使用。(5)添加某些生长因子、激素等添加物,可能会改变培养液的储存条件,比如温度、时间等方面的要求。2023-08-09 22:16:531
什么是培养液
细胞放在体外培养,需要配置一定适宜的液体环境来使细胞分裂、分化这个液体就称为培养液2023-08-09 22:17:032
求大神解答:细胞换液和细胞传代是不是同一种操作?如果不是,两个有什么区别?
不是同一种操作。 细胞换液:随着细胞培养时间的的延长,培养基中的营养物被消耗,细胞的代谢产物愈来愈多,尤其是细胞呼吸反应释放出的CO2及其它酸性代谢产物的增加,培养液的pH值越来越低,培养液的颜色越来越黄。此时就需要对细胞进行换液。换液时吸掉旧培养液,用PBS 洗涤细胞一至二次,加入适量的新鲜培养基即可。 细胞传代:随着培养时间的延长和细胞不断分裂,细胞之间相互接触而发生接触性抑制,生长速度减慢甚至停止。此时就需要将培养皿(瓶)中的细胞分成几份,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养,这个过程就称为传代。 传代步骤: 1、吸掉旧培养液,用PBS 洗涤细胞一至二次。 2、加入trypsin-EDTA 溶液,37 度作用数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量含血清的新鲜培养基终止trypsin作用,离心后再吸掉上清液。 3、加入适量的新鲜培养基,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。2023-08-09 22:17:241
接种培养后,液体培养基有澄清变浑浊为什么是细菌大量
细菌是颗粒状的,当细菌在液体培养液中大量繁殖,相当于液体中存在大量的不溶性颗粒物,这些颗粒物的大小足以阻挡光线通过,看起来液体就显得混浊.2023-08-09 22:17:331
mrs培养基如何配制
mrs培养基的组织成分: 组成成 重 量(g) 牛肉蛋白粉 10 鱼肉汁 10 酵母浸出汁粉 5 葡萄糖 20 醋酸钠 5 柠檬酸二铵 2 吐温80 0.1 硫酸镁 0.58 硫酸锰 0.28 蒸溜水 1 000ml 备注:用高压锅在121℃灭菌15min,调节pH6.2~6.4 LC培养基只能计数干酪乳杆菌,MRS—水杨素(或山梨醇)培养基可以计数嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌;而MRS培养基可以计数这3种益生菌,通过减法原则从嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌和双歧杆菌混合物中单独计数。另外,MRS—NNLP培养基也可用于选择性计数双歧杆菌2023-08-09 22:17:534
生根培养基配置方法
MS培养基+NAA,你可以试试。2023-08-09 22:18:522
在植物组织培养中,什么叫液体培养基的重悬?
根据培养基的物理性质,可分为液体培养基、固体培养基和半固体培养基。 液体培养基:用各种营养成分加水配成,或用天然物质的浸汁(麦芽汁、豆芽汁等)制成。组分均一,适宜各类微生物的营养生长。广泛应用于实验研究及大规模工业生产中,有利于广泛获得大量菌体或代谢产物。详见http://www.jshlzx.net/klh/7/746/text/zk46_108.htm2023-08-09 22:19:022
细胞培养液有哪几种类型?
取决于细胞类型或者说生长/新陈代谢的速度,一般哺乳动物细胞在2-4天换液的比较常见2023-08-09 22:19:113
为什么动物细胞培养通常要加入血清血浆
提供全面的营养。2023-08-09 22:19:2210
培养液是什么
培养液又称:植物培养液,常用户水培植物的营养供给。培养液是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。中文名称 培养液英文名称 culture medium定 义 用于进行组织或细胞培养的介质之统称。应用学科 细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)以上内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布培养液又称:植物培养液,常用户水培植物的营养供给。Parker等根据氨基酸和维生素等物质的生理含量制备出一种基本培养液,后来Eagle等对来源于人的细胞株进行更深入的研究后发现胞质内的氨基酸及维生素的含量比基本培养液中大1-5倍,而且其中谷氨酰胺等13种氨基酸和8种维生素是必需的,于是将这些物质的浓度调整到接近细胞质内含量的水平,制成了最低必需培养液(Eagle"s minimum essential medium, MEM),是常用的培养液。2023-08-09 22:20:411
酵母菌培养液是怎么配制的
酵母菌是一类真菌,最通用的培养基是马铃薯蔗糖琼脂培养基,其配方为:马铃薯 20g(去皮后,煮汁)蔗糖 2g自来水 100mL琼脂 2gpH 自然(约6.0)灭菌 1.05kg/cm2,20min其PH值不用调整,因为配出来后它大约为6.0左右,符合酵母菌的生长PH范围。扩展资料酵母(saccharomyce) 是基因克隆实验中常用的真核生物受体细胞,培养酵母菌和培养大肠杆菌一样方便。酵母克隆载体的种类也很多。酵母菌也有质粒存在,这种2pm 长的质粒称为2um 质粒,约6 300bp。这种质粒至少有一段时间存在于细胞核内染色体以外,利用2pm 质粒和大肠杆菌中的质粒可以构建成能穿梭于细菌与酵母菌细胞之间的穿梭质粒。酵母克隆载体都是在这个基础上构建的。酵母是一种单细胞真菌,并非系统演化分类的单元。一种肉眼看不见的微小单细胞微生物,能将糖发酵成酒精和二氧化碳,分布于整个自然界,是一种典型的异养兼性厌氧微生物,在有氧和无氧条件下都能够存活,是一种天然发酵剂。一般泛指能发酵糖类的各种单细胞真菌,可用于酿造生产,也可为致病菌——遗传工程和细胞周期研究的模式生物。酵母菌是人类文明史中被应用得最早的微生物。目前已知有1000多种酵母,根据酵母菌产生孢子(子囊孢子和担孢子)的能力,可将酵母分成三类:形成孢子的株系属于子囊菌和担子菌。不形成孢子但主要通过出芽生殖来繁殖的称为不完全真菌,或者叫“假酵母”(类酵母)。目前已知极少部分酵母被分类到子囊菌门。酵母菌在自然界分布广泛,主要生长在偏酸性的潮湿的含糖环境。2018年2月,酵母长染色体的精准定制合成荣获科技部2017年度中国科学十大进展。酵母菌同其它活的有机体一样需要相似的营养物质,像细菌一样它有一套胞内和胞外酶系统,用以将大分子物质分解成细胞新陈代谢易利用的小分子物质,属于异养生物。参考资料百度百科。酵母菌2023-08-09 22:20:511
植物的培养液怎么配制?
一、常用的几种营养液配方1、硝酸钠10克、过磷酸钙70克、硫酸铵25克、硫酸钾35克、硫酸镁40克.用法:利用以上配方配制营养液时,先将其与水混合,然后再按每100升水加3克的比例加入混合好的微量元素才可使用(微量元素通常以硫酸亚铁100克、硼酸粉14克、硫酸锰10克混匀研成粉末备用).2、硝酸钾0.7克/升、硼酸0.0006克/升、硝酸钙0.7克/升、硫酸锰0.0006克/升、过磷酸钙0.8克/升、硫酸锌0.0006克/升、硫酸镁0.28克/升、硫酸铜0.0006克/升、硫酸铁0.12克/升、钼酸铵0.0006克/升.用法:使用时,将各种元素混合在一起,加水1公升,即成为营养液.在配制上述营养液时,可以根据不同花卉的不同要求,对元素的种类和用量予以增减.3、尿素5克、磷酸二氢钾3克、硫酸钙1克、硫酸镁0.5克、硫酸锌0.001克、硫酸铁0.003克、硫酸铜0.001克、硫酸锰0.003克、硼酸粉0.002克;加水10升,溶解后即制成营养液.用法:盆花生长期每周浇一次,每次用量可根据植株大小酌定.例如花盆内径20厘米的喜阳性花卉,每次约浇100毫升,而阴性花卉用量酌减.冬季或休眠期,每半月或1个月浇一次.平时水分补充仍用自来水.二、配制营养液时要注意的问题1、配制营养液时,忌用金属容器,更不能用它来存放营养液,最好使用玻璃、搪瓷、陶瓷器皿.2、在配制时最好先用50℃的少量温水将各种无机盐类分别溶化,然后按照配方中所开列的物品顺序倒入装有相当于所定容量75%的水中,边倒边搅拌,最后将水加到足量.3、在配制营养液时如果使用自来水,则要对自来水进行处理,因为自来水中大多含有氯化物和硫化物,它们对植物均有害,还有一些重碳酸盐也会妨碍根系对铁的吸收.因此,在使用自来水配制营养液时,应加入少量的乙二胺四乙酸钠或腐殖酸盐化合物来处理水中氯化物和硫化物.如果无土栽培的基质采用泥炭,就可以消除上述的缺点.如果地下水的水质不良,可以采用无污染的河水或湖水配制.三、怎样调整营养液的酸碱度营养液的酸碱度直接影响营养液中养分存在的状态、转化和有效性.如磷酸盐在碱性时易发生沉淀,影响利用;锰、铁等在碱性溶液中由于溶解度降低也会发生缺乏症.所以营养液中酸碱度(即pH值)的调整是不可忽略的.pH值的测定可采用混合指示剂比色法,根据指示剂在不同pH值的营养液中显示不同颜色的特性,以确定营养液的pH值.营养液一般用井水或自来水配制.如果水源的pH值为中性或微碱性,则配制成的营养液pH值与水源相近,如果不符要进行调整.在调整pH值时,应先把强酸、强碱加水稀释(营养液偏碱时多用磷酸或硫酸来中和,偏酸时用氢氧化钠来中和),然后逐滴加入到营养液中,同时不断用pH试纸测定,至中性为止.不同地方进行无土栽培生产时,由于配制营养液的水的来源不同,可能会或多或少地影响到配制的营养液,有时会影响到营养液中某些养分的有效性,有时甚至严重影响到作物的生长.因此,在进行无土栽培生产之前,要先对当地的水质进行分析检验,以确定所选用的水源是否适宜.2023-08-09 22:21:152
培养基和培养液的区别是什么
培养液是培养基的一种我们把液体培养基叫培养液培养基分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基希望帮到你!2023-08-09 22:21:242
酵母菌培养液的配制是什么?
酵母菌是一类真菌,最通用的培养基是马铃薯蔗糖琼脂培养基,其配方为:马铃薯 20g(去皮后,煮汁)蔗糖 2g自来水 100mL琼脂 2gpH 自然(约6.0)灭菌 1.05kg/cm2,20min其PH值不用调整,因为配出来后它大约为6.0左右,符合酵母菌的生长PH范围。酵母是一种单细胞真菌,并非系统演化分类的单元。一种肉眼看不见的微小单细胞微生物,能将糖发酵成酒精和二氧化碳,分布于整个自然界,是一种典型的异养兼性厌氧微生物,在有氧和无氧条件下都能够存活,是一种天然发酵剂。生理特性酵母是单细胞微生物。它属于高等微生物的真菌类。有细胞核、细胞膜、细胞壁、线粒体、相同的酶和代谢途径。酵母无害,容易生长,空气中、土壤中、水中、动物体内都存在酵母。有氧气或者无氧气都能生存。酵母是兼性厌氧生物,未发现专性厌氧的酵母,在缺乏氧气时,发酵型的酵母通过将糖类转化成为二氧化碳和乙醇(俗称酒精)来获取能量。2023-08-09 22:21:331
请问LB培养液是什么?
LB培养液是培养细菌常用的液体培养基. 配方是: 胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化钠(NaCl) 10g/L 蒸馏水 将上述配方加到烧瓶中,高温高压灭菌后即可使用.2023-08-09 22:21:561
植物营养完全培养液怎么做
1、硝酸钠10克、过磷酸钙70克、硫酸铵25克、硫酸钾35克、硫酸镁40克。用法:利用以上配方配制营养液时,先将其与水混合,然后再按每100升水加3克的比例加入混合好的微量元素才可使鼡(微量元素通常以硫酸亚铁100克、硼酸粉14克、硫酸锰10克混匀研成粉末备用)。2、硝酸钾0.7克/升、硼酸0.0006克/升、硝酸钙0.7克/升、硫酸锰0.0006克/升、过磷酸钙0.8克/升、硫酸锌0.0006克/升、硫酸镁0.28克/升、硫酸铜0.0006克/升、硫酸铁0.12克/升、钼酸铵0.0006克/升。用法:使用时,将各种元素混合在一起,加水1公升,即成为营养液。在配制上述营养液时,可以根据不同花卉的不同要求,对え素的种类和用量予以增减。3、尿素5克、磷酸二氢钾3克、硫酸钙1克、硫酸镁0.5克、硫酸锌0.001克、硫酸铁0.003克、硫酸铜0.001克、硫酸锰0.003克、硼酸粉0.002克;加水10升,溶解后即制成营养液。用法:盆花生长期每周浇一次,每次鼡量可根据植株大小酌定。例如花盆内径20厘米的喜阳性花卉,每次约浇100毫升,而阴性花卉用量酌减。冬季或休眠期,每半月或1个月浇一次。平时水分补充仍用自来水。2023-08-09 22:22:051
各种规格的细胞培养瓶需要多少培养液和胰酶?本人要用T300的
楼上说的有理,看情况的.不过一般T25用1ml,T75用2-3ml,T150用5ml,T300用8ml2023-08-09 22:22:141
液体培养基浑浊,但是没有感染,是为什么?
你确定没有“污染”?高倍镜下多看看。或者是取样培养基上清离心简单做个革兰氏染色,实在不确定也可以打需养厌氧瓶瓶子检测2023-08-09 22:22:252
培养皿里面一般是什么培养液,能用活细胞当培养液吗
你是不是智……慧树上智慧果,智慧树下你和我。2023-08-09 22:22:474
植物培养基的制培养液
为了避免每次配制培养基都要对几十种化学药品进行称量,应该将培养基中的各种成分,按原量10倍、100倍或1000倍称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做母液。这样,每次配制培养基时,取其总量的1/10、1/100、1/1000,加以稀释,即成培养液。现将培养液中各类物质制备母液的方法说明如下。(1)大量元素。大量元素包括硝酸铵等用量较大的几种化合物。制备时,按表中排列的顺序,以其10倍的用量,分别称出并进行溶解,以后按顺序混在一起,最后加蒸馏水,使其总量达到1升,此即大量元素母液。(2)微量元素。因用量少,为称量方便和精确起见,应配成100倍或1000倍的母液。配制时,每种化合物的量加大100倍或1000倍,逐次溶解并混在一起,制成微量元素母液。(3)铁盐。铁盐要单独配制。由硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)5.57克和乙二胺四乙酸二钠(Na—EDTA)7.45克溶于1升水中配成。每配1升培养基,加铁盐5毫升。(4)有机物质。主要指氨基酸和维生素类物质。它们都是分别称量,分别配成所需的浓度(0.1~1.0毫克/毫升),用时按培养基配方中要求的量分别加入。(5)植物激素。最常用的有生长素和细胞分裂素。这类物质使用浓度很低,一般为0.01~10毫克/升。可按用量的100倍或1000倍配制母液,配制时要单个称量,分别贮藏。配制植物生长素时,应先按要求浓度称好药品,置于小烧杯或容量瓶中,用1~2毫升0.1N(克当量浓度)氢氧化钠溶解,再加蒸馏水稀释至所需浓度。配制细胞分裂素时,应先用少量0.5或1N的盐酸溶解,然后加蒸馏水至所需量。以上各种混合液(母液)或单独配制药品,均应放入冰箱中保存,以免变质、长霉。至于蔗糖、琼脂等,可按配方中要求,随称随用。 ①根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。②将①中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。③将①中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000毫升,搅拌均匀,配成培养基。④用1N的氢氧化钠或盐酸,滴入③中的培养基里,每次只滴几滴,滴后搅拌均匀,并用pH试纸测其pH值,直到将培养基的pH值调到5.8。⑤将配好的培养基,用漏斗分装到三角瓶(或试管)中,并用棉塞塞紧瓶口,瓶壁写上号码。瓶中培养基的量约为容量的1/4或1/5。培养基的成分比较复杂,为避免配制时忙乱而将一些成分漏掉,可以准备一份配制培养基的成分单,将培养基的全部成分和用量填写清楚。配制时,按表列内容顺序,按项按量称取,就不会出现差错。成分单的格式与内容见表9-2。 培养基配制完毕后,应立即灭菌。培养基通常应在高压蒸汽灭菌锅内,在汽相120℃条件下,灭菌20分钟。如果没有高压蒸汽灭菌锅,也可采用间歇灭菌法进行灭菌,即将培养基煮沸10分钟,24小时后再煮沸20分钟,如此连续灭菌三次,即可达到完全灭菌的目的。经过灭菌的培养基应置于10℃下保存,特别是含有生长调节物质的培养基,在4~5℃低温下保存要更好些。含吲哚乙酸或赤霉素的培养基,要在配制后的一周内使用完,其它培养基最多也不应超过一个月。在多数情况下,应在消毒后两周内用完。2023-08-09 22:22:561
细菌培养的具体培养步骤
以光合细菌培养方法为例。光合细菌培养的方法,按次序分为容器、工具的消毒,培养基的制备,接种和培养管理四个步骤。(一)容器、工具的消毒参考、此处从略。(二)培养基的制备1.培养用水如果培养的光合细菌是淡水种,菌种培养可用蒸馏水,生产培养可用消毒的自来水(或井水)配制。如果培养的光合细菌是海水种,则用天然海水配制培养基,注意在海水中加入磷元素时,不能用磷酸氢二钾,应用磷酸二氢钾,不然会产生大量沉淀。2.灭菌和消毒菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸气灭菌锅灭菌。小型生产性培养可把配好的培养液用普通铝锅或大型三角烧瓶煮沸消毒。大型生产性培养则把经沉淀砂滤后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后使用。3.培养基配制根据所培养种类的营养需要选择合适的培养基配方。按培养基配方把所需物质称量,逐一溶解,混合,配成培养基。也可先配成母液,使用时按比例加入一定的量即可。(三)接种培养基配好后,应立即进行接种。光合细菌生产性培养的按种量比较高,一般为20%~50%,即菌种母液量和新配培养液虽之比为1∶4~1∶1,不应低于20%,尤其是微气培养,接种量更应高些,否则光合细菌在培养液中很难占绝对优势,影响培养的最终产量和质量。(四)培养管理光合细菌的培养过程中,管理工作包括日常管理操作和测试,生长情况的观察、检查以及出现问题的分析处理等三个方面。2023-08-09 22:23:121
螺旋藻的养殖流程是什么
摘要:螺旋藻属绿色保健食品,养殖周期短,见效快,接种后,一般经过7~10天养殖就可采收,其养殖流程是挑选养殖方法、选用螺旋藻良种、制作营养液、接种、扩藻、施肥、采收这几个步骤。养殖的螺旋藻方法有很多,包括家庭养殖、简易养殖、天然湖泊养殖、工厂化养殖这几种,接下来就和小编一起来看看吧。螺旋藻的养殖流程是什么1、挑选养殖方法从实际出发,采用不同的养殖方式,家庭养殖可以选购螺旋藻家庭培养仪,简易养殖可以选择带有简单搅拌设备的养殖池。一般来说,养殖池应采用敞开式水泥池设计模式,搅拌设备应采用车轮式搅拌机,这样能使水流产生旋涡流以达到更好的搅拌效果。2、选用螺旋藻良种一般宜选择藻丝体较长的极大螺旋藻,钝顶节螺藻也行。极大螺旋藻的藻丝体长600~800μm,螺旋直径50~60μm,藻丝直径6~7μm,螺旋数5~8个,适合于温带生长。3、制作营养液螺旋藻培养液成分由螺旋藻生长发育所需的各种营养盐组成,由碳酸氢钠、碳酸钠、氯化、硫酸钾、硫酸镁、氯化钙等组成。通过适当调配,该螺旋藻培养基能够满足日产干粉10g/d·_及以上产量水平对营养元素的需求。4、接种在实验室中保持一定量的优良藻种,当自然环境温度上升到15~20℃时,达到螺旋藻体开始生长的基本条件,即可接种到大池中,进行扩大培养。5、扩藻接种后,经过5~7天培养,当培养液OD值达到0.8时,即可按1:3比例进一步扩藻,扩藻后藻液OD值控制在0.2以上。当藻池全部扩满,最先扩藻的藻池OD值达到1.0以上时即可进行采收。6、施肥根据螺旋藻的生产情况,及时补充各种营养成分。每隔4~5天少量补加小苏打和尿素,其它肥料每半个月添加一次。7、日常管理(1)做好螺旋藻养殖日志。记录气温、水温、天气状况、降雨量,藻池pH值、OD值、藻体生长状况、营养成分监测情况、镜检情况等。(2)及时搅拌。搅拌可使池子藻液受光均匀、气体交换充分、营养盐分布均匀。在天气晴朗、气温高时宜多搅拌,阴雨天气、气温低时搅拌次数可少一些。一般每30分钟搅一次,每次时间掌握在池水流动2圈为宜。(3)捞除杂物及泡沫。由于采取敞开式养殖模式,昆虫、杂草等其他杂物容易人池,影响产品质量,应经常组织人员使用网目大小适宜的捞网捞除杂物。搅拌机在搅拌过程中易产生泡沫,影响藻体采光及气体交换,降低藻体光合作用,因此必须经常捞除水面泡沫。8、采收当藻池藻液浓度OD值达到1.0时,即可进行螺旋藻采收。采收时间宜选择在上午7时到10时进行,通过水泵抽取藻液,经斜面筛网过滤收集成藻泥,再置专用收藻车上用自来水直接清洗,最后经适当干燥加工成藻粉。养殖的螺旋藻方法有哪些1、家庭养殖可以选购螺旋藻家庭培养仪,也可自选搪瓷盆(最好全白色)或缸钵,但铝盆不能用。养殖规模应以人年耗用螺旋藻量而定。2、简易养殖简易养殖主要是指设备简单的养殖方法,养殖池可以就地取材,只要不漏水就行。池深30厘米,面积应尽可能大一些。3、天然湖泊养殖螺旋藻原本是自然生长在咸水湖泊中的原始藻,利用天然湖泊养殖是最原始,也是最经济的生产方式。其对设备要求很低,只需在打涝和加工上投资,湖水的肥力可以由其自然恢复。但由于螺旋藻对光照、温度、pH值等有特殊要求,不是所有湖泊都能养殖,而应通过实验、研究,选择适宜其生殖的湖泊进行养殖。4、工厂化养殖工厂化养殖设备先进,要求严格。当前,养殖池以跑道式椭圆形水泥池为好,养殖面积最好是1.5万平方米为一单元。可采用开放式培养,也可进行封闭式生产。开放式培养是一种接近自然的生产方式,分淡水制、海水制,多数培养池都设计成可循环式,用搅拌机搅动,培养液的深度为15厘米~25厘米,以日光为光源和热源。封闭式生产是指在一密闭的生物反应器内借助自然光或人工光照进行工厂化繁殖螺旋藻的一种生产方式。2023-08-09 22:23:251
培养基与培养液的差别什么叫完全培养液
你好!培养基是固态的,培养液为液态的,两者主要成分不同。完全培养液是指培养液中含有所培养物质全部所需要营养成分。培养基一般需要加入琼脂等固态物质,如果将固态培养基加热,可能其会变为液态。2023-08-09 22:23:352