干粉引物怎么稀释到工作液

引物合成时nmol为1，OD为0.2，怎么稀释

稀释引物要达到的浓度（pmol/ul）＝母液浓度（pmol/ul）×汲取母液的体积（ul）÷（汲取母液的体积（ul）＋加水量（ul））引物一般来的时候是干粉.这种状态能保存最长的时间.如果用的话要先离心,5分钟（12000转）.然后用它上面写的nmol*1000/你的终浓度=你要加的水量溶解液有TE和dd水.TE其实就是tris盐酸和EDTA的混合液.理论上用TE保存好,不容易降解.一般配的时候要先配成储存液（浓度是100umol/L）,在配成使用液（浓度是10umol/L）.这样的好处是引物不容易降解.引物忌讳反复冻溶,大家要注意.如果你都配成了使用液就应该分装.使用液放在4度（2/3个月没问题的）,储存液放在-20度.引物稀释很简单,一般装引物的管子上都标有引物的量如3.6nmol/OD,可直接往管中加360ul的无菌双蒸水溶解就可以了,在加水之前要先高速离心管子几分钟,加水后要高速漩涡混匀几分钟就可以用了,此时的储存浓度是10umol/L,如果体系是20ul一般加1ul引物(引物的使用浓度最大为10pmol/ul,但一般在0.5-5pmol/ul即可 ).引物的浓度设定,不同的人有不同习惯,有的喜欢稀释成100uM的,有的习惯于稀释成20uM,也有的稀释成10uM的.建议稀释成20uM的浓度,因为如果你稀释成100uM,当你所做PCR的体系不是很大的时候,体积太小了引物就不好加,容易产生误差；如果是稀释成10uM,引物浓度过低,容易降解.不过不管你稀释成多大浓度的,最好分装保存,免得反复冻融容易降解.

2023-08-06 11:28:111

引物稀释后能保存多久?在什么温度保存合适?谢谢!

引物在溶解前,室温状态下都可以长期保存.使用pH7.5-8.0的TE 缓冲液溶解引物,在-20℃可以保存两个月甚至半年以上,-4℃保存两周一般也没有问题.不建议使用蒸馏水溶解引物,因为有些蒸馏水的 pH 值比较低（ pH4-5 ） , 引物在这种条件下不稳定. 另外需要提醒的是收到引物后一定先离心,将引物粉末收集于管底再打开离心管:)

2023-08-06 11:28:202

请问引物是怎么稀释的？

上面网友讲的估计应该会出现在你合成的引物单上。 在实际操作时，你首先需要进行离心。离心前请不要打开盖子。 离心后，在离心管底可见白色沉淀，这时你可根据合成单上的说明，加入适量的ddH2O或者Elution Buffer。合成单上标有Tm值，OD值以及引物长度等。通常，会有1OD=?ug的标记（由于引物长度不同，此处数值也对应不同），直接按？？值加入等量ddH2O（如20ug对应加入20ul水）便可稀释为1ug/ul 最后充分涡旋，使沉淀完全溶解。 -20度保存，使用时，应稀释10倍。

2023-08-06 11:28:401

请问引物是怎么稀释的？

上面网友讲的估计应该会出现在你合成的引物单上。 在实际操作时，你首先需要进行离心。离心前请不要打开盖子。 离心后，在离心管底可见白色沉淀，这时你可根据合成单上的说明，加入适量的ddH2O或者Elution Buffer。合成单上标有Tm值，OD值以及引物长度等。通常，会有1OD=?ug的标记（由于引物长度不同，此处数值也对应不同），直接按？？值加入等量ddH2O（如20ug对应加入20ul水）便可稀释为1ug/ul 最后充分涡旋，使沉淀完全溶解。 -20度保存，使用时，应稀释10倍。

2023-08-06 11:28:491

生工引物怎么稀释? 用的是生工合成的引物,该怎么稀释啊?我们之前稀释的好像有问题~

你的引物合成报告单上肯定有每OD含有的DNA的量的.一般来说,如果你定的引物是1OD的话,直接加入每OD×10倍的水,就可以得到100uM的DNA溶液. 举个例子,比如你的引物是5nmol/OD的,那么加入50μL的水,可以得到100uM的DNA溶液.

2023-08-06 11:28:581

引物合成时nmol为1,OD为0.2,怎么稀释?？

1nmol用10 ul ddH2O稀释,浓度为100 uM,此浓度为储藏浓度,工作浓度要稀释到10 uM. 订引物时候,填10 nmol就可以了,不用管 OD,7, abcjc110 举报 我需要工作浓度，直接加100ul 的dd 水就行？一般需要分装2管，定引物时候，填20nmol对吧 可以,引物合成时nmol为1,OD为0.2,怎么稀释? 定引物时,OD／ umol应该怎么填

2023-08-06 11:29:151

【求助】请问引物合成后，该怎样保存，使用时该怎样稀释？

引物合成后干粉状态在室温下可以放半年，溶解后室温下也可以放一周，但是最好是-20度保存。你可以用灭菌水进行稀释，不过用TE进行稀释更有利于引物的保存，浓度看你自己的需要了 ，每个人都有自己的习惯，有的稀释成20uM，有的稀释成10uM，有的稀释成100uM都可以。保存在-20度，稀释可以加DDH2O，加多少合成引物时，公司会告诉你的，不稀释，直接-20度保存可以吗？引物刚拿回来要离心。因为干粉可能粘在管口处。离心后可以直接放－20度。用的时候根据需要稀释。可以的推荐一篇好文章：乙型肝炎病毒基因型研究新进展(期刊论文)>合成单上有说明，按说明做就行

2023-08-06 11:29:241

引物稀释后能保存多久？在什么温度保存合适?谢谢！

-20摄氏度放个一两年没有问题

2023-08-06 11:29:322

合成的引物怎么溶解

◆干粉引物溶解稀释方法：收到引物后，在开启离心管盖前在3000-4000转/分钟的转速下离心1分钟，以防开盖时引物干粉散失。引物保存在高浓度的状况下比较稳定。如果对实验的重复性要求较高，合成的OD数较大，建议分装，避免反复冻融。引物一般配制成10-100pmol/uL(umol/L)。引物管上标有1OD 相当于多少umol 的计算结果，进行稀释时的引物加水量可以按以下公式计算：稀释成100pmol/ul 1OD 需加水量（ul）=1OD相当于umol 数×10000例如，您拿到的引物DNA合成报告单上标有1OD≈0.0035umol ，包装量是1OD/管，如果您希望将引物浓度定为10umol/L，那么只需用350ul无核酸酶的双蒸水将1OD的引物干粉溶解即可。◆液体引物再稀释可用下列公式：稀释引物要达到的浓度（pmol/ul）＝母液浓度（pmol/ul）×汲取母液的体积（ul）÷（汲取母液的体积（ul）＋加水量（ul））引物一般来的时候是干粉。这种状态能保存最长的时间。如果用的话要先离心，5分钟（12000转）。然后用它上面写的nmol*1000/你的终浓度=你要加的水量溶解液有TE和dd水。TE其实就是tris盐酸和EDTA的混合液。理论上用TE保存好，不容易降解。一般配的时候要先配成储存液（浓度是100umol/L）,在配成使用液（浓度是10umol/L）。这样的好处是引物不容易降解。引物忌讳反复冻溶，大家要注意。如果你都配成了使用液就应该分装。使用液放在4度（2/3个月没问题的），储存液放在-20度。引物稀释很简单，一般装引物的管子上都标有引物的量如3.6nmol/OD, 可直接往管中加360ul的无菌双蒸水溶解就可以了，在加水之前要先高速离心管子几分钟，加水后要高速漩涡混匀几分钟就可以用了，此时的储存浓度是10umol/L，如果体系是20ul一般加1ul引物(引物的使用浓度最大为10pmol/ul，但一般在0.5-5pmol/ul即可 )。引物的浓度设定，不同的人有不同习惯，有的喜欢稀释成100uM的，有的习惯于稀释成20uM,也有的稀释成10uM的。建议稀释成20uM的浓度，因为如果你稀释成100uM，当你所做PCR的体系不是很大的时候，体积太小了引物就不好加，容易产生误差；如果是稀释成10uM，引物浓度过低，容易降解。不过不管你稀释成多大浓度的，最好分装保存，免得反复冻融容易降解。

2023-08-06 11:29:421

引物合成时nmol为1,OD为0.2,怎么稀释? 定引物时,OD／ umol应该怎么填

1nmol用10 ul ddH2O稀释,浓度为100 uM,此浓度为储藏浓度,工作浓度要稀释到10 uM. 订引物时候,填10 nmol就可以了,不用管 OD

2023-08-06 11:30:011

合成的引物怎么溶解

◆干粉引物溶解稀释方法： 收到引物后,在开启离心管盖前在3000-4000转/分钟的转速下离心1分钟,以防开盖时引物干粉散失.引物保存在高浓度的状况下比较稳定.如果对实验的重复性要求较高,合成的OD数较大,建议分装,避免反复冻融.引物一般配制成10-100pmol/uL(umol/L). 引物管上标有1OD 相当于多少umol 的计算结果,进行稀释时的引物加水量可以按以下公式计算： 稀释成100pmol/ul 1OD 需加水量（ul）=1OD相当于umol 数×10000 例如,您拿到的引物DNA合成报告单上标有1OD≈0.0035umol ,包装量是1OD/管,如果您希望将引物浓度定为10umol/L,那么只需用350ul无核酸酶的双蒸水将1OD的引物干粉溶解即可. ◆液体引物再稀释可用下列公式： 稀释引物要达到的浓度（pmol/ul）＝母液浓度（pmol/ul）×汲取母液的体积（ul）÷（汲取母液的体积（ul）＋加水量（ul）） 引物一般来的时候是干粉.这种状态能保存最长的时间. 如果用的话要先离心,5分钟（12000转）.然后用它上面写的nmol*1000/你的终浓度=你要加的水量 溶解液有TE和dd水.TE其实就是tris盐酸和EDTA的混合液.理论上用TE保存好,不容易降解. 一般配的时候要先配成储存液（浓度是100umol/L）,在配成使用液（浓度是10umol/L）.这样的好处是引物不容易降解. 引物忌讳反复冻溶,大家要注意.如果你都配成了使用液就应该分装.使用液放在4度（2/3个月没问题的）,储存液放在-20度. 引物稀释很简单,一般装引物的管子上都标有引物的量如3.6nmol/OD,可直接往管中加360ul的无菌双蒸水溶解就可以了,在加水之前要先高速离心管子几分钟,加水后要高速漩涡混匀几分钟就可以用了,此时的储存浓度是10umol/L,如果体系是20ul一般加1ul引物(引物的使用浓度最大为10pmol/ul,但一般在0.5-5pmol/ul即可 ). 引物的浓度设定,不同的人有不同习惯,有的喜欢稀释成100uM的,有的习惯于稀释成20uM,也有的稀释成10uM的.建议稀释成20uM的浓度,因为如果你稀释成100uM,当你所做PCR的体系不是很大的时候,体积太小了引物就不好加,容易产生误差；如果是稀释成10uM,引物浓度过低,容易降解.不过不管你稀释成多大浓度的,最好分装保存,免得反复冻融容易降解.

2023-08-06 11:30:091

引物可以常温放多久 引物稀释后能保存多久

1、引物在溶解前，室温状态下都可以长期保存。使用pH7.5-8.0的TE 缓冲液溶解引物，在-20℃可以保存两个月甚至半年以上，-4℃保存两周一般也没有问题。 2、不建议使用蒸馏水溶解引物，因为有些蒸馏水的 pH 值比较低（ pH4-5 ） ， 引物在这种条件下不稳定。 另外需要提醒的是收到引物后一定先离心，将引物粉末收集于管底再打开离心管。

2023-08-06 11:30:161

溶解引物需要什么水

先离心！然后加入适量的水或TE溶解。一般配制成较高浓度的母液（约100μM），保存于-20℃。使用前取出其中一部分用ddH2O配制成10μM或20μM的工作液。引物浓度不宜偏高，浓度过高有两个弊端：一是容易形成引物二聚体（primer-dimer），二是当扩增微量靶序列并且起始材料又比较粗时，容易产生非特异性产物。一般说来，用低浓度引物不仅经济，而且反应特异性也较好。一般终浓度用0.25-0.5pM/μl较好。1 引物的分子量如何计算？ 比如：AAGCTTTTACCGC的分子量是多少？2 OD值，1个OD值是不是等于40UG。3 质量数，质量数的含义是什么，怎么计算？4摩尔数（μmol）和终浓度(pM)和稀释水量（μl）是不是计算稀释引物都要用到以上四点的各个参数？具体的公式是什么呢？合成引物的单子上应该有算法：1OD=33ug1个碱基的分子量=324.5（以上为近似值，通常都这样用）1条引物的分子量=碱基数*324.5质量数=OD*33ug摩尔数=质量数/分子量先离心的原因是什么？因为引物合成后是干粉状的，在运输过程中可能会沾到管壁或管盖上，直接打开有些粉末可能会飘出去，引物的量就减少了。先离心使粉末都到管底，可以避免这种现象的发生。然后根据以下公式可计算出所加双蒸水的量33nmol/OD×管上所标OD值×100是为10pmol/ul浓度的引物溶液,还可以由此推算其它浓度所需的双蒸水量。可于－20度保存。订引物回来的说明书背面一般都有引物稀释计算的说明的.注意分装！

2023-08-06 11:30:261

引物稀释 物质的量 1uM=10pM，正确否

不对。应该是1微摩尔等于10的6次方皮摩尔。。。那应该是稀释10的负七次方倍吧……既然是稀释，那肯定不是1uM=10pM了。

2023-08-06 11:30:341

引物稀释中水和TE的区别

稀释引物要达到的浓度（pmol/ul）＝母液浓度（pmol/ul）×汲取母液的体积（ul）÷（汲取母液的体积（ul）＋加水量（ul））引物一般来的时候是干粉.这种状态能保存最长的时间.如果用的话要先离心,5分钟（12000转）.然后用它上面写的nmol*1000/你的终浓度=你要加的水量溶解液有TE和dd水.TE其实就是tris盐酸和EDTA的混合液.理论上用TE保存好,不容易降解.一般配的时候要先配成储存液（浓度是100umol/L）,在配成使用液（浓度是10umol/L）.这样的好处是引物不容易降解.引物忌讳反复冻溶,大家要注意.如果你都配成了使用液就应该分装.使用液放在4度（2/3个月没问题的）,储存液放在-20度.引物稀释很简单,一般装引物的管子上都标有引物的量如3.6nmol/OD,可直接往管中加360ul的无菌双蒸水溶解就可以了,在加水之前要先高速离心管子几分钟,加水后要高速漩涡混匀几分钟就可以用了,此时的储存浓度是10umol/L,如果体系是20ul一般加1ul引物(引物的使用浓度最大为10pmol/ul,但一般在0.5-5pmol/ul即可 ).引物的浓度设定,不同的人有不同习惯,有的喜欢稀释成100uM的,有的习惯于稀释成20uM,也有的稀释成10uM的.建议稀释成20uM的浓度,因为如果你稀释成100uM,当你所做PCR的体系不是很大的时候,体积太小了引物就不好加,容易产生误差；如果是稀释成10uM,引物浓度过低,容易降解.不过不管你稀释成多大浓度的,最好分装保存,免得反复冻融容易降解.

2023-08-06 11:30:441

PCR 怎样稀释

博凌科为-为你解答：浓度一般是10uM吧。50ul体系一般加引物1uL。合成引物的管上会标注每管引物的mol数，按引物干粉的量加上相应的双蒸水就可以了。

2023-08-06 11:30:541

娃哈哈能稀释rna引物吗

dna引物稀释用娃哈哈吗是可以的，当然可以。如果是DNA常规引物,买点娃哈哈纯净水,灭菌后就能用来溶解引物的。

2023-08-06 11:31:011

求助 takara合成的引物如何稀释

做PCR吗？看看管子上有多少nmol，然后加对应的ddH20.比如4nmol就加400μl的ddH2O，那么终浓度就是100p

2023-08-06 11:31:091

PCR 怎样稀释 做50微升体系的PCR使用的引物浓度是多少?怎样稀释?

博凌科为-为你浓度一般是10uM吧.50ul体系一般加引物1uL.合成引物的管上会标注每管引物的mol数,按引物干粉的量加上相应的双蒸水就可以了.

2023-08-06 11:31:371

引物合成时nmol为1，OD为0.2，怎么稀释？

1nmol用10 ul ddH2O稀释，浓度为100 uM,此浓度为储藏浓度，工作浓度要稀释到10 uM.订引物时候，填10 nmol就可以了，不用管 OD

2023-08-06 11:31:511

PCR反应引物浓度多少合适（工作液），储备液浓度多少？

储备液一般是100uM，也有稀释成10uM的。反正做PCR的最终其工作液终浓度范围是0.2μmol/L左右。我一般把引物稀释成10uM，25微升PCR体系一般加0.4-1.0微升的引物。

2023-08-06 11:32:011

请问PCR引物浓度是如何设定的?

>>> 一般都稀释成应用液，常用浓度是10uM/L也就是10pM/L.这样的话，20ul体系加1ul，50ul体系加2ul，方便使用！至于引物会不会降解的问题，估计高浓度比低浓度保存时间长说法是对的。但是，通常引物在20度放半年都没有问题，如果不是经常用，可以先取出一部分来用，其余都放-80度保存，可以放很久。 引物稀释很简单，一般装引物的管子上都标有引物的量如3.6nM,你直接往管中加360ul的无菌双蒸水溶解就可以了 ，在加水之前要先高速离心管子几分钟，加水后要高速漩涡混匀几分钟就可以用了。

2023-08-06 11:32:101

引物浓度

通常拿到的引物有1OD或者2.5OD等等 拿1 OD的引物来说 合成后通常有个说明书 1 0D的引物物质的量大概是在5nmol 那么我们通常是加入500ul的水稀释 这个时候引物的浓度是10umol/l 也就是你用的浓度 如果取1ul引物的话 物质的量是 10umol/L x 1ul = 10 x 10的负6次方 umol = 10 pmol 所以需要10pmol的话直接加1ul引物就可以了 34pmol就是加3.4ul就可以了 关键就是看你一开始引物是怎么稀释的 然后慢慢换算就行了

2023-08-06 11:32:191

荧光定量PCR引物稀释错了影响大吗?

大。有极大可能影响实验结果。实时荧光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。Real-timePCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。

2023-08-06 11:32:271

DNA引物稀释时TE加多了，怎么办？

低压蒸干。

2023-08-06 11:32:355

引物稀释成使用液后放在-20度，两年会不会失效或效果大大降低？

应该不会失效，但是效果难免有所降低。放置于-20度保存，但最好少量分装，以避免污染。

2023-08-06 11:33:191

2OD的引物怎么稀释？

生工的引物合成单上有相关信息，请仔细查找。

2023-08-06 11:33:283

上海生工引物没有报告单怎么稀释

引物管壁上标注的n mol 数乘以10所得数就是终浓度达到100umol所需加稀释液的量（ul）

2023-08-06 11:33:471

pcr试剂问题——引物稀释时误用DEPC水

是因为，depc未经高压蒸汽，即未分解未CO2和乙醇，严重抑制核酸聚合酶的活性，所以不能qpcr结果

2023-08-06 11:33:561

microRNA引物稀释倍数

35。microrna是一种核苷酸，核苷酸对基因的表达调控发挥着重要的作用。因为血清microrna含量太低，所以倍数值为35。

2023-08-06 11:34:021

引物稀释用双蒸水还是用TE好

不同物质取用不同，一般用双蒸水，成本低

2023-08-06 11:34:091

PCR引物存放时间是多少

最近做PCR实验好几次都扩不出来(郁闷死，以前从没这问题)，反应体系和条件都是以前一见摸索好了的，唯一可能的问题就是试剂出问题了。 PCR引物存放时间，这要看是什么状态，要是粉末的话，在-20度可以存放好几年;要是已经把引物稀释成液体状态的话，存放时间就要短一点了，但也可以存放一年左右的时间，甚至更长。 不过这也要看你们实验室的冰箱是不是经常开启，要是是的话，存放时间就很受影响，实验室的冰箱就是经常打开，而且有时候大家找东西要找好长时间，所以引物总是用半个多月的时间，效力就下降了，PCR后的条带明显就没有以前亮了。 建议你合成引物的时候，让公司每个OD分装成一管，每次你用的时候，取一管稀释成使用浓度;或者先稀释到储存浓度，分装后要用的时候再稀释到使用浓度。另外一定要注意避免反复冻融，反复冻融会使存放时间变短的。 最简单的就是分装了,以储存浓度保存,稀释10或20微升,就可以用好些次,即可避免反复冻融还可以避免整管引物都被污染. 干粉-20度可以保存一年，稀释后-20度可以保存半年。 可以先稀释成100uM，分装成几管。然后再稀释成50uM和20uM的。每次用20uM的做PCR即可。尽量避免反复冻融。 稀释用的水PH值要求大于7(TE比灭菌去离子水好)，并且无菌。 真空干燥的DNA呈干膜状或粉末状在离心管底部，开启瓶盖时小心不要丢失。 稀释方法：1 OD260引物干粉约为33微克; 碱基的平均分子量为324.5; 引物的分子量=碱基数 x 碱基的平均分子量; 引物的摩尔数=质量数 / 引物分子量 举例：一管标明为2 OD的20碱基的引物， 分子量=20 x 324.5=6490 质量数=2 x 33 =66μg 摩尔数=66 / 6490 =0.010 μmol= 10 nmol 若您需要溶解为10μM(=10pmol/μl)的溶液，只需加10/=10pmol/ul,=1mlddH2O充分溶解即可。

2023-08-06 11:34:191

干粉状态的引物,根据什么,怎么稀释成溶液保存?

根据摩尔数稀释稀释成你所需的浓度。

2023-08-06 11:34:282

做配药品，稀释引物，PCR实验中，对水的要求要很高么

博凌科为-为你解答：你用的depc水是depc处理水？还是还有千分之一depc的水，这两个概念不一样的。depc处理水是需要高压的，在高压后是不含有depc的。而千分之一的depc水中，因为depc是很强的蛋白诱变剂，因此对你后续的聚合酶的活性肯定是有影响的。如果你用的是后者，没有结果结果很正常。

2023-08-06 11:34:396

pcr扩增时,引物浓度一般需要多大?加多少?

通常拿到的引物有1 OD或者2.5 OD等等 拿1 OD的引物来说 合成后通常有个说明书 1 0D的引物物质的量大概是在5 nmol 那么我们通常是加入500 uL的水稀释 这个时候引物的浓度是10 umol/L 也就是你用的浓度 如果取1 uL引物的话 物质的量是 10 umol/L x 1 uL = 10 x 10的负6次方 umol = 10 pmol 一般而言25 uL的反应体系上下游引物各加入10 pmol,当然可以根据具体实验需要进行相应调整 关键就是看你一开始引物是怎么稀释的 然后慢慢换算就行了

2023-08-06 11:34:571

pcr扩增 订制了引物 但是送来的引物好像是空的 学长说要按说明书稀释

您好，引物合成后会干燥保存，为干粉状态。引物管上的标签一般会标注有加水量，把引物管稍离心后，按照标注加入无菌水即可。根据自己的用途不同稀释成相应的浓度。

2023-08-06 11:35:061

引物上写着5.46nmol如何溶解为20pM

1 nmol= 1000 pmol , 5460 pmol/20 pM =273 ul , 加273 ul dd H2O 即可

2023-08-06 11:35:132

PCR反应引物浓度多少合适（工作液）,储备液浓度多少?

储备液一般是100uM,也有稀释成10uM的.反正做PCR的最终其工作液终浓度范围是0.2μmol/L左右.我一般把引物稀释成10uM,25微升PCR体系一般加0.4-1.0微升的引物.

2023-08-06 11:35:361

PCR引物浓度一般选多少？

我使用的引物一般稀释到10μM. 20微升体系每个引物加0.4微升即可。你的50微升体系加1微升也不算多。你降低下退火温度试一试。

2023-08-06 11:35:431

引物稀释的母液放在4度冰箱一周有问题吗？

没关系的，我一个月都放过，能用

2023-08-06 11:35:532

Pcr第三方质控品怎么稀释加最后多少倍

每次拿到反转的cDNA后，先稀释3倍左右。引物一般交由试剂公司合成，有时候具体的浓度我们也不能确定。有些人喜欢稀释十倍，有些人喜欢稀释二十倍。个人认为比较稳妥的做法是在每次拿到反转的cDNA后，先会稀释3倍左右，然后利用管家基因做一次RT-PCR，循环数一般为25循环，鉴定一下具体浓度，再决定最后的稀释倍数。

2023-08-06 11:36:001

PCR正反引物加水稀释倍数不一样

引物稀释倍数太高，降解就比较快，你可以先到10×，从10×中取一些再到1×。

2023-08-06 11:36:071

引物浓度问题

我说错了，第一个人回答的是正确的

2023-08-06 11:36:163

进行PCR扩增时为什么将cDNA模板稀释以后就出现引物二聚体了？

根本原因应该是RNA纯度不够，导致反转录的cDNA浓度低。稀释之后DNA与引物结合的机会少了，引物自己结合成二聚体.多种原因要逐一排除：1.先用内参基因检测一下如β-actin，GAPDH，18s-rRNA这类基因是生物体或者细胞中稳定表达的基因，表达量几乎不变，如果有条带证明反转录没问题。2.内参检测时候最好让别人代为操作，可以排除人为操原因3.跑PCR时候可以加一个内参做阳性对照，保证CDNA质量（反复冻融会影响CDNA质量）4.适当降低退火温度2~4℃5.上述都排除之后就是引物问题了。PCR试剂除了taq酶要放在-20℃，其他的都不能反复冻融。建议分装出来后长期保存放-20使用液放4℃。

2023-08-06 11:36:251

我想向你请教一下PCR的问题

引物合成一般有一样随引物一起发出的引物合成单上，上面会有详细的说明，至于50微升体系是指你所有要加的试剂加起来是50微升，其中Buffer的工作浓度为1乘，另外也可以用20微升体系等进行PCR。一般你所购买的PCR试剂盒都应该有详细的说明。

2023-08-06 11:36:411

弱弱的问个问题，现在有三十二对引物，浓度为100μM，做10μl的PCR反应体系，上下游引物各需5pmol，我该怎

很简单，看你每对引物最终需要用多少次。针对10次而言，每对引物各取母液（浓度100μM）0.5μl加入到9μl无菌去离子水中，每个PCR反应加1μl混合好的引物。

2023-08-06 11:36:512

引物30umol/l，怎么算加入的体积

稀释引物要达浓度（pmol/ul）＝母液浓度（pmol/ul）×汲取母液体积（ul）÷（汲取母液体积（ul）＋加水量（ul））引物般候干粉.种状态能保存间.用要先离,5钟（12000转）.用面写nmol*1000/终浓度=要加水量溶解液TEdd水.TE其实tris盐酸EDTA混合液.理论用TE保存,容易降解.般配候要先配储存液（浓度100umol/L）,配使用液（浓度10umol/L）.处引物容易降解.引物忌讳反复冻溶,家要注意.都配使用液应该装.使用液放4度（2/3月没问题）,储存液放-20度.引物稀释简单,般装引物管都标引物量3.6nmol/OD,直接往管加360ul菌双蒸水溶解,加水前要先高速离管几钟,加水要高速漩涡混匀几钟用,储存浓度10umol/L,体系20ul般加1ul引物(引物使用浓度10pmol/ul,般0.5-5pmol/ul即 ).引物浓度设定,同同习惯,喜欢稀释100uM,习惯于稀释20uM,稀释10uM.建议稀释20uM浓度,稀释100uM,所做PCR体系候,体积太引物加,容易产误差；稀释10uM,引物浓度低,容易降解.管稀释浓度,装保存,免反复冻融容易降解.

2023-08-06 11:37:001

引物稀释无菌水加多了会怎么样

1、用户转发或分享，会考虑到这个内容能反映他们是什么样的人，朋友圈里大多是自己的亲戚家人。这种忧虑会让让微信运营人感受到，用户对内容进行高度的选择。2、不同身份的人也决定了，分享内容是能帮助他显示他的身份时，内容被分享和转载的居多。

2023-08-06 11:37:191

稀释引物时涡旋震荡容易断吗

没关系，引物都很短，断不了的。

2023-08-06 11:37:261

稀释好的引物，探针放在室内一晚了，会有影响吗

会的，因为它也会蒸发在空气中

2023-08-06 11:37:331